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透析用水·透析液液细菌培养,必须掌握的几点

2022-03-09 11:20:09 5950

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“女神节,

愿身边和远方的女性朋友

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“水”在血液透析治疗中起着主导作用。一次透析大约要用120升水。大部分的水来自透析用水。与浓缩透析液按一定比例混合后,各项指标均合格(如细菌、内毒素、电导率、温度、pH值等。).用于“细菌培养”的培养基应使用寡营养培养基,而不是血液培养基(寡营养培养基)。今天和你一起学习TGEA的知识!

透析中心没有合格的“水”,离关闭整改也不远了。在保证合格“水”的同时,还要进行高质量的检测和评估,实事求是地做好每一件与我们生活相关的事情,不能有任何侥幸心理。

首先,为什么要关注“水液”的细菌问题?

在水和透析液中,常见的细菌有革兰氏阴性菌和非结核分枝杆菌,它们特别适合在水中生活。当透析用水和透析液有合适的温度、营养和pH值时,革兰氏阴性菌可迅速繁殖,如果透析膜受损,细菌可进入患者血液,引起毒血症。即使透析膜没有破裂,细菌产物和细胞膜成分也能通过透析器的膜孔进入血液,引起患者的热原反应,使患者出现发热、寒战、低血压、恶心等症状,严重者导致患者死亡。

如何杀死细菌?如加热和化学消毒,也可以被一些系统过滤掉。(这部分是为给水管道的水处理和消毒而设计的,这里暂且不讨论。请留言!)

关于细菌培养:

根据行业标准YY0572-2015和2021 SOP要求:透析用水和透析液的细菌培养标准;如下图所示:“透析用水和透析液,细菌总数不超过100CFU/ml,超过50%,应进行干预”

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【重点】如何准确获取细菌总数?

可以选择胰化蛋白胨葡萄糖(tryptone glucose extract agar,TGEA)培养基, R2A营养琼脂培养基或其他证实提供相同结果的培养基,但不能使用血琼脂培养基和巧克力琼脂培养基。

【培养条件】培养温度17 ~ 23,培养时间7d。

[合适的培养基]常用TGEA/R2A的介绍

TGEA配制和使用方式[3](一般机构,其准备和培训由临床实验室完成;透析中心需要做的:确认培养基和取样方法与标准的一致性)

1.适用于检测水或乳制品中的细菌数量,检测嗜热微生物。

2.公式:

牛肉提取物)3.0

胰蛋白酶)5.0

1.0克葡萄糖

琼脂(琼脂)15.0

pH值为7.00.2

3.用法:

将上述24g成分溶于1升蒸馏水中,煮沸至成分完全溶解。121高压灭菌15分钟,冷却至50左右,然后倒入培养皿中,室温固化。

4.注释参考:

这个量的培养基可以制备50个培养皿(按每个培养皿20ml计算)。如果用户认为这个数量太多,可以按比例减少数量。例如,24g可溶于1L蒸馏水中,可制备50个培养皿。12g可溶于500ml蒸馏水中,可制备25个培养皿。6g溶于2

50ml蒸馏水,可制备12.5只培养皿,以此类推。       

5、储存条件       (只适用于商品性TGEA培养基)干燥的培养基应储存于25摄氏度以下,并在有效期前使用。       

制成后的培养基应以塑料袋密封并于2~8摄氏度储存,保存期为14天。       

“开始下面学习之前,先邀请您做个小调查”(单选)       

【正确的采样方法】       [3]       

反渗水采样方法       

①使用反渗水循环管道末端的采样口或者把透析机连接到循环管道处的软管拆下(如果在此处安装有采样口,可直接取样)。       

②打开反渗水球阀,用反渗水冲洗球阀内部30s。       

③用70%的酒精消毒反渗水管球阀下的接头外侧,最好连续消毒两次。       

④等酒精已完全挥发,用已灭菌的瓶子或试管收集反       渗水,注意瓶子或试管入口不 能碰到接头(采样口)外侧。             

透析液细菌采样方法:       

①将透析浓缩液连接到血液透析机上,让机器进入自检状态。       

②待血液透析机的自检程序结束以后,安装一次性透析器和透析管路。       

③将透析液快速接头按照要求连接到透析器上。       

④让透析液由下向上进入透析器。       

⑤关闭透析液,取下透析器透析液出口的快速接头。       

⑥将透析器倾斜45度,打开透析液开关,让透析液自然流出。       

⑦用已灭菌的瓶子或试管收集透析液,注意瓶子或试管入口不能碰到接头(透析器透析液出口)外侧。       

注意:透析液采样:目前多数采取下面的方法进行采集:      

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【严格采样工具与容器】

【及时送检】样本在4小时内进行检测,或立即冷藏,并在24小时内进行检测。若是第三方送检,必须与第三方沟通采样时间,避免长时间冷藏堆积在医院影响检测结果。                   

【培养方法】采用常规的细菌总数检测方法(倾注平板法、涂布平板法、薄膜过滤法),薄膜过滤法是首选检测方法,不接受接种环法。

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【建立良好的沟通】,如,危急值报告制度 认真履行“细菌总数超过50%”即刻告知透析中心,以便尽快并及时采取措施。             

记住:无论是自己单位的检验科还是第三方送检,均应建立此制度。       

【深化细菌总数动态评价理念】 将每月不同采样点的不同细菌总数进行纵向比较,以便根据其变化趋势调整水处理消毒频率。       

编后语:血液透析方方面面,需要正确的采样、标准的检测获得真实的结果,还要及时评价,做好必要时的补救措施,以免耽误肾友治疗!      


参考:            

[1]血液净化标准操作规程2021版

[2]YY0572-2015

[3]血液净化临床工程技师日常工作内容和常规操作的指导意见

[4]《血液净化学》第4版

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